Sephadex - Sephadex
Sephadex é um gel de dextrano reticulado usado para filtração em gel . Foi lançado pela Pharmacia em 1959, após trabalho de desenvolvimento de Jerker Porath e Per Flodin . O nome é derivado da se paração Pha rmacia dex tran. Normalmente é fabricado em forma de grânulo e mais comumente usado para colunas de filtração de gel . Variando o grau de reticulação, as propriedades de fracionamento do gel podem ser alteradas.
Esses meios cromatográficos e de filtração em gel altamente especializados são compostos de grânulos macroscópicos derivados sinteticamente do polissacarídeo dextrano. As cadeias orgânicas são reticuladas para dar uma rede tridimensional com grupos iônicos funcionais ligados por ligações éter a unidades de glicose das cadeias de polissacarídeos.
As formas disponíveis incluem trocadores de ânions e cátions, bem como resinas de filtração em gel, com vários graus de porosidade; os tamanhos dos grânulos estão em intervalos discretos entre 20 e 300 µm .
Sephadex também é usado para cromatografia de troca iônica.
Formulários
Sephadex é usado para separar moléculas por peso molecular. Sephadex é uma alternativa mais rápida à diálise (dessalinização), exigindo um fator de baixa diluição (tão pequeno quanto 1,4: 1), com recuperações de alta atividade. Sephadex também é usado para troca de tampão e remoção de pequenas moléculas durante a preparação de grandes biomoléculas, como anfólitos, detergentes, marcadores radioativos ou fluorescentes e fenol (durante a purificação do DNA).
Uma forma especial hidroxipropilada de resina Sephadex, denominada Sephadex LH-20, é usada para a separação e purificação de pequenas moléculas orgânicas, como esteróides, terpenóides, lipídeos. Um exemplo de uso é a purificação do colesterol.
Fracionamento
Cromatografia de exclusão.
Faixa de Fracionamento de Proteínas Globulares e Dextranos (Da).
| Tipo de Gel | Faixa de Fracionamento | |
|---|---|---|
| Globular
Proteínas |
Dextrans | |
| G-10 | ≤700 | ≤700 |
| G-15 | ≤1500 | ≤1500 |
| G-25 | 1000–5000 | 100-5.000 |
| G-50 | 1500-30.000 | 500–10.000 |
| G-75 | 3.000-80.000 | 1000-50.000 |
| G-75 SF | 3.000-70.000 | 1000-50.000 |
| G-100 | 4000-150.000 | 1000-100.000 |
| G-100 SF | 4000-100.000 | 1000-100.000 |
| G-150 | 5.000 a 300.000 | 1000-150.000 |
| G-150 SF | 5.000-150.000 | 1000-150.000 |
| G-200 | 5.000-600.000 | 1000–200.000 |
| G-200 SF | 5.000–250.000 | 1000–200.000 |
Cromatografia de troca iônica.
| Descrição | Funcionalidade | Tamanho do grânulo (µ) |
|---|---|---|
| Sephadex-CM C-25 | carboximetil | 40-120 |
| Sephadex-CM C-50 | carboximetil | 40-120 |
| Sephadex-DEAE A-25 | 2- (dietilamino) etil | 40-120 |
| Sephadex-DEAE A-50 | 2- (dietilamino) etil | 40-120 |
| Sephadex-QAE A-25 | aminoetil quaternário | 40-120 |
| Sephadex-QAE A-50 | aminoetil quaternário | 40-120 |
| Sephadex-SP C-25 | sulfopropil | 40-120 |
| Sephadex-SP C-50 | sulfopropil | 40-120 |