Citocentrífuga - Cytocentrifuge
Uma citocentrífuga , às vezes chamada de citocentrífuga , é uma centrífuga especializada usada para concentrar células em amostras de fluido em uma lâmina de microscópio para que possam ser coradas e examinadas. As citocentrífugas são utilizadas em várias áreas do laboratório clínico , como citopatologia , hematologia e microbiologia , bem como na investigação biológica. O método pode ser usado em muitos tipos diferentes de espécimes, incluindo aspirados por agulha fina , líquido cefalorraquidiano , líquido seroso e sinovial e urina .
Procedimento
Para preparar esfregaços de citocentrífuga, um funil é conectado à frente de uma lâmina de microscópio. A superfície da montagem do funil que está em contato com a lâmina é forrada com papel de filtro para absorver o excesso de fluido. Algumas gotas de fluido são colocadas no funil. O conjunto é colocado na citocentrífuga, que opera com uma força baixa (600–800 xg) para preservar a estrutura celular. A força centrífuga empurra o fluido através da abertura do funil e concentra as células em uma pequena área do slide. O processo de centrifugação concentra as células em cerca de vinte vezes e cria uma monocamada de uma célula de espessura, permitindo a avaliação da morfologia celular. A lâmina pode então ser fixada e tingida.
Formulários
Algumas aplicações de citocentrífugas incluem:
- Realizar contagens celulares diferenciais em fluidos corporais, como fluido seroso , sinovial e cerebrospinal
- Exame citopatológico de amostras líquidas, como fluidos corporais e aspirados com agulha fina
- Coloração de Gram de amostras de fluido para identificação de microorganismos
Limitações
O processo de citocentrifugação pode fazer com que as células pareçam distorcidas. As células localizadas no centro do esfregaço podem parecer comprimidas em comparação com as células na periferia. Os núcleos celulares podem desenvolver fendas, lóbulos ou orifícios artefatos, e o citoplasma pode parecer vacuolado ou desenvolver projeções irregulares. Os grânulos citoplasmáticos podem ser empurrados para a periferia da célula. Se a contagem de células for alta, as células podem ser distorcidas devido ao aglomerado; portanto, as amostras com contagens de células altas são diluídas antes da preparação do esfregaço.
História
O exame das células nos fluidos corporais era historicamente realizado por meio de um hemocitômetro , uma câmara projetada para contagem microscópica de células. Essa técnica era limitada pela pouca discriminação entre os tipos de células (as células só podiam ser classificadas como mononucleares ou polimorfonucleares) e pelo baixo número de células presentes em fluidos corporais não concentrados. Além disso, essa técnica não produziu um registro permanente do espécime. Em um artigo de 1966, Watson P. descreveu a primeira citocentrífuga, chamando-a de "um aparelho para concentrar células em suspensão em uma lâmina de microscópio". O dispositivo foi vendido comercialmente na década de 1970 e em 1983 foi patenteado pela Shandon (agora Thermo Scientific ). Desde 2012, várias marcas de citocentrífuga existem no mercado.