Maturação de afinidade - Affinity maturation
Em imunologia , de maturação de afinidade é o processo pelo qual T FH de células activadas por células B produzem anticorpos com maior afinidade para o antigénio durante o curso de uma resposta imune. Com exposições repetidas ao mesmo antígeno, um hospedeiro produzirá anticorpos de afinidades sucessivamente maiores . Uma resposta secundária pode induzir anticorpos com afinidade várias vezes maior do que em uma resposta primária. A maturação de afinidade ocorre principalmente na imunoglobulina de superfície das células B do centro germinativo e como resultado direto da hipermutação somática (SHM) e seleção por células T FH .
Na Vivo
Acredita-se que o processo envolva dois processos inter-relacionados, ocorrendo nos centros germinativos dos órgãos linfoides secundários:
- Hipermutação somática : Mutações nas sequências codificantes de ligação ao antígeno variáveis (conhecidas como regiões determinantes de complementaridade (CDR)) dos genes da imunoglobulina. A taxa de mutação é até 1.000.000 vezes maior do que em linhas celulares fora do sistema linfóide. Embora o mecanismo exato do SHM ainda não seja conhecido, um papel importante para a desaminase induzida por ativação (citidina) foi discutido. O aumento da taxa de mutação resulta em 1-2 mutações por CDR e, portanto, por geração de células. As mutações alteram a especificidade de ligação e as afinidades de ligação dos anticorpos resultantes.
- Seleção clonal : as células B que foram submetidas a SHM devem competir para limitar os recursos de crescimento, incluindo a disponibilidade de antígenos e sinais parácrinos das células T FH . As células dendríticas foliculares (FDCs) dos centros germinativos apresentam antígeno para as células B, e a progênie de células B com maiores afinidades pelo antígeno, tendo ganho vantagem competitiva, é favorecida para a seleção positiva levando à sua sobrevivência. A seleção positiva é baseada na interferência constante entre as células T FH e suas células B GC que apresentam antígeno cognato. Como um número limitado de células T FH reside no centro germinativo, apenas células B altamente competitivas se conjugam de forma estável com células T FH e, assim, recebem sinais de sobrevivência dependentes de células T. A descendência de células B que foram submetidas a SHM, mas que se ligam ao antígeno com menor afinidade, será eliminada e eliminada. Ao longo de várias rodadas de seleção, os anticorpos secretados resultantes produzidos terão afinidades efetivamente aumentadas para o antígeno.
Em vitro
Como o protótipo natural, a maturação de afinidade in vitro é baseada nos princípios de mutação e seleção. A maturação de afinidade in vitro foi usada com sucesso para otimizar anticorpos, fragmentos de anticorpos ou outras moléculas de peptídeo como miméticos de anticorpos . Mutações aleatórias dentro dos CDRs são introduzidas usando radiação , mutagênicos químicos ou PCR propensa a erros . Além disso, a diversidade genética pode ser aumentada pelo embaralhamento de cadeias . Duas ou três rodadas de mutação e seleção usando métodos de exibição como exibição de fago geralmente resulta em fragmentos de anticorpos com afinidades na faixa nanomolar baixa.