Esfregaço de sangue - Blood film

Esfregaço de sangue
Esfregaço de sangue periférico - manchado e não manchado.jpg
Dois esfregaços de sangue periférico do tipo push adequados para caracterização de elementos sanguíneos celulares. O esfregaço esquerdo não está corado, o esfregaço direito está manchado com a coloração de Wright-Giemsa.
ICD-9-CM 90,5
MedlinePlus 003665

Um filme de sangue -ou esfregaço de sangue periférico -é uma fina camada de sangue manchada sobre um vidro lâmina de microscópio e em seguida coradas, de tal modo a permitir que as diversas células do sangue a ser examinadas ao microscópio. Os esfregaços de sangue são examinados na investigação de distúrbios hematológicos (sangue) e são rotineiramente empregados para procurar parasitas sanguíneos , como os da malária e da filariose .

Preparação

Os esfregaços de sangue são feitos colocando-se uma gota de sangue em uma das extremidades de uma lâmina e usando uma lâmina disseminadora para dispersar o sangue por toda a extensão da lâmina. O objetivo é obter uma região, chamada de monocamada, onde as células são espaçadas o suficiente para serem contadas e diferenciadas. A monocamada é encontrada na "borda emplumada" criada pela lâmina separadora à medida que puxa o sangue para frente.

Esfregaço não manchado
Imaculado
Esfregaço manchado
Manchado de Wright-Giemsa
Close da borda emplumada de manchas de sangue. A faixa média pálida do gradiente é a monocamada.

A lâmina é deixada para secar ao ar, após o que o sangue é fixado na lâmina por imersão brevemente em metanol . O fixador é essencial para uma boa coloração e apresentação dos detalhes celulares. Após a fixação, a lâmina é tingida para distinguir as células umas das outras.

A análise de rotina do sangue em laboratórios clínicos é geralmente realizada em esfregaços de sangue corados com corantes Romanowsky , tais como corante de Wright , corante de Giemsa , ou Diff-Quik . A combinação de pigmentos Wright-Giemsa também é uma escolha popular. Essas manchas permitem a detecção de anormalidades nos glóbulos brancos , glóbulos vermelhos e plaquetas . Os hematopatologistas costumam usar outras colorações especializadas para auxiliar no diagnóstico diferencial de doenças do sangue.

Após a coloração, a monocamada é visualizada ao microscópio com ampliação de até 1000x. As células individuais são examinadas e sua morfologia é caracterizada e registrada.

Significado clínico

Esfregaço de sangue humano normal
Esfregaço de sangue na leucemia mieloide crônica
A imagem da esquerda mostra uma visão microscópica de um esfregaço de sangue normal de um adulto, enquanto a imagem da direita mostra um esfregaço de sangue de um paciente com leucemia mieloide crônica .

O exame de esfregaço de sangue é geralmente realizado em conjunto com um hemograma completo para investigar resultados anormais ou confirmar resultados que o analisador automático sinalizou como não confiáveis.

O exame microscópico da forma, tamanho e coloração dos glóbulos vermelhos é útil para determinar a causa da anemia . Distúrbios como anemia por deficiência de ferro , anemia falciforme , anemia megaloblástica e anemia hemolítica microangiopática resultam em anormalidades características no esfregaço sanguíneo.

As proporções dos diferentes tipos de glóbulos brancos podem ser determinadas a partir do esfregaço de sangue. Isso é conhecido como diferencial manual de leucócitos . O diferencial de leucócitos pode revelar anormalidades nas proporções dos tipos de leucócitos, como neutrofilia e eosinofilia , bem como a presença de células anormais, como as células blásticas circulantes vistas na leucemia aguda . Anormalidades qualitativas dos glóbulos brancos, como granulação tóxica , também são visíveis no esfregaço de sangue. Os modernos analisadores de hemograma podem fornecer um diferencial automatizado de leucócitos, mas têm uma capacidade limitada de diferenciar células imaturas de anormais, portanto, o exame manual do esfregaço de sangue é freqüentemente indicado.

O esfregaço de sangue é o método de diagnóstico preferido para certas infecções parasitárias, como malária e babesiose . Raramente, as bactérias podem ser visíveis no esfregaço de sangue em pacientes com sepse grave .

Malária

Esfregaços de sangue mostrando vários estágios de desenvolvimento do parasita da malária Plasmodium falciparum , corados com a coloração de Wright e a coloração de Giemsa .

O diagnóstico preferido e mais confiável de malária é o exame microscópico de esfregaços de sangue, porque cada uma das quatro principais espécies de parasitas tem características distintas. Dois tipos de esfregaço são tradicionalmente usados.

  • Filmes finos são semelhantes aos esfregaços de sangue comuns e permitem a identificação da espécie, porque a aparência do parasita é mais bem preservada nesta preparação.
  • Filmes espessos permitem que o microscopista rastreie um volume maior de sangue e são cerca de onze vezes mais sensíveis do que os filmes finos, portanto, detectar baixos níveis de infecção é mais fácil no filme espesso, mas a aparência do parasita é muito mais distorcida e, portanto, distinguir entre as diferentes espécies pode ser muito mais difícil.

A partir da película espessa, um microscopista experiente pode detectar todos os parasitas que encontra. O diagnóstico microscópico pode ser difícil porque os trofozoítos iniciais ("forma de anel") de todas as quatro espécies parecem idênticos e nunca é possível diagnosticar espécies com base em uma única forma de anel; a identificação das espécies é sempre baseada em vários trofozoítos.

A maior armadilha na maioria dos laboratórios de países desenvolvidos é deixar um atraso muito grande entre a coleta da amostra de sangue e a realização dos esfregaços. Conforme o sangue esfria até a temperatura ambiente, os gametócitos masculinos se dividem e liberam microgametas : são estruturas filamentosas sinuosas e longas que podem ser confundidas com organismos como a Borrelia . Se o sangue for mantido em temperaturas mais altas, os esquizontes se rompem e os merozoítos que invadem os eritrócitos darão erroneamente a aparência da forma acolé de P. falciparum . Se P. vivax ou P. ovale for deixado por várias horas em EDTA, o acúmulo de ácido na amostra fará com que os eritrócitos parasitados encolham e o parasita se enrole, simulando o aparecimento de P. malariae . Este problema é agravado se forem usados anticoagulantes como a heparina ou o citrato . O anticoagulante que causa menos problemas é o EDTA . A coloração Romanowsky ou uma coloração variante é geralmente usada. Alguns laboratórios usam erroneamente o mesmo pH de coloração que usam para esfregaços de sangue de hematologia de rotina ( pH 6,8): esfregaços de sangue de malária devem ser corados em pH 7,2, ou os pontos de Schüffner e de James não serão vistos.

Os procedimentos de captura imunocromatográfica (testes de diagnóstico rápido, como os testes de detecção do antígeno da malária ) são opções de diagnóstico não microscópicas para o laboratório que pode não ter conhecimento de microscopia apropriado disponível.

Referências

links externos