Cultura de células - Cell culture

Cultura de células em uma pequena placa de Petri
Células epiteliais em cultura, coradas para queratina (vermelho) e DNA (verde)

A cultura de células é o processo pelo qual as células são cultivadas sob condições controladas, geralmente fora de seu ambiente natural. Após as células de interesse terem sido isoladas de tecido vivo , elas podem ser subsequentemente mantidas sob condições cuidadosamente controladas. Essas condições variam para cada tipo de célula, mas geralmente consistem em um recipiente adequado com um substrato ou meio que fornece os nutrientes essenciais ( aminoácidos , carboidratos , vitaminas , minerais ), fatores de crescimento , hormônios e gases ( CO 2 , O 2 ) e regula o ambiente físico-químico ( tampão de pH , pressão osmótica , temperatura ). A maioria das células requer uma superfície ou um substrato artificial (cultura aderente ou monocamada), enquanto outras podem ser cultivadas flutuando livremente no meio de cultura ( cultura em suspensão ). O tempo de vida da maioria das células é determinado geneticamente, mas algumas células em cultura de células foram "transformadas" em células imortais que se reproduzirão indefinidamente se as condições ideais forem fornecidas.

Na prática, o termo "cultura celular" refere-se agora para a cultura de células derivadas a partir de multicelulares eucariotas , especialmente de origem animal células, em contraste com outros tipos de cultura que também crescer células, tais como a cultura de tecidos vegetais , de fungos cultura, e cultura microbiológica ( de micróbios ). O desenvolvimento histórico e os métodos de cultura de células estão intimamente relacionados aos da cultura de tecidos e da cultura de órgãos . A cultura viral também está relacionada, com as células como hospedeiras dos vírus.

A técnica de laboratório de manter linhas de células vivas (uma população de células descendentes de uma única célula e contendo a mesma composição genética) separadas de sua fonte de tecido original tornou-se mais robusta em meados do século XX.

História

A fisiologista inglesa do século 19, Sydney Ringer, desenvolveu soluções de sal contendo cloretos de sódio, potássio, cálcio e magnésio, adequadas para manter o batimento cardíaco de um animal isolado fora do corpo. Em 1885, Wilhelm Roux removeu uma porção da placa medular de uma galinha embrionária e a manteve em solução salina morna por vários dias, estabelecendo o princípio da cultura de tecidos. Ross Granville Harrison , trabalhando na Johns Hopkins Medical School e depois na Yale University , publicou os resultados de seus experimentos de 1907 a 1910, estabelecendo a metodologia da cultura de tecidos .

As técnicas de cultura de células avançaram significativamente nas décadas de 1940 e 1950 para apoiar a pesquisa em virologia . O cultivo de vírus em culturas de células permitiu a preparação de vírus purificados para a fabricação de vacinas . A vacina injetável contra poliomielite desenvolvida por Jonas Salk foi um dos primeiros produtos produzidos em massa usando técnicas de cultura de células. Essa vacina foi possibilitada pela pesquisa em cultura de células de John Franklin Enders , Thomas Huckle Weller e Frederick Chapman Robbins , que receberam o Prêmio Nobel pela descoberta de um método de cultivo do vírus em culturas de células renais de macacos .

Conceitos em cultura de células de mamíferos

Isolamento de células

As células podem ser isoladas de tecidos para cultura ex vivo de várias maneiras. As células podem ser facilmente purificadas do sangue; no entanto, apenas os glóbulos brancos são capazes de crescer em cultura. As células podem ser isoladas de tecidos sólidos por digestão da matriz extracelular usando enzimas como colagenase , tripsina ou pronase , antes de agitar o tecido para liberar as células em suspensão. Alternativamente, pedaços de tecido podem ser colocados em meio de crescimento e as células que crescem ficam disponíveis para cultura. Este método é conhecido como cultura de explante .

As células que são cultivadas diretamente de um sujeito são conhecidas como células primárias. Com exceção de alguns derivados de tumores, a maioria das culturas de células primárias tem vida útil limitada.

Uma linha celular estabelecida ou imortalizada adquiriu a capacidade de proliferar indefinidamente por meio de mutação aleatória ou modificação deliberada, como a expressão artificial do gene da telomerase . Numerosas linhas de células estão bem estabelecidas como representativas de tipos de células particulares .

Manter células em cultura

Para a maioria das células primárias isoladas, elas passam pelo processo de senescência e param de se dividir após um certo número de duplicações da população, embora geralmente retenham sua viabilidade (descrita como o limite de Hayflick ).

Uma garrafa de meio de cultura de células DMEM

Além da temperatura e da mistura de gases, o fator mais comumente variado em sistemas de cultura é o meio de crescimento celular . As receitas dos meios de crescimento podem variar em pH , concentração de glicose, fatores de crescimento e a presença de outros nutrientes. Os fatores de crescimento usados ​​para suplementar os meios são freqüentemente derivados do soro de sangue animal, como soro fetal bovino (FBS), soro bovino de bezerro, soro equino e soro suíno. Uma complicação desses ingredientes derivados do sangue é o potencial de contaminação da cultura com vírus ou príons , particularmente em aplicações de biotecnologia médica . A prática atual é minimizar ou eliminar o uso desses ingredientes sempre que possível e usar lisado de plaquetas humanas (hPL). Isso elimina a preocupação de contaminação entre espécies ao usar FBS com células humanas. O hPL surgiu como uma alternativa segura e confiável como um substituto direto para FBS ou outro soro animal. Além disso, meios definidos quimicamente podem ser usados ​​para eliminar qualquer vestígio de soro (humano ou animal), mas isso nem sempre pode ser realizado com diferentes tipos de células. Estratégias alternativas envolvem obter sangue animal de países com risco mínimo de BSE / TSE , como Estados Unidos, Austrália e Nova Zelândia, e usar concentrados de nutrientes purificados derivados de soro no lugar de soro animal inteiro para cultura de células.

A densidade de placas (número de células por volume de meio de cultura) desempenha um papel crítico para alguns tipos de células. Por exemplo, uma densidade de plaqueamento mais baixa faz com que as células da granulosa exibam produção de estrogênio, enquanto uma densidade de plaqueamento mais alta faz com que elas apareçam como células teca luteína produtoras de progesterona .

As células podem ser cultivadas em suspensão ou em culturas aderentes. Algumas células vivem naturalmente em suspensão, sem estar presas a uma superfície, como as células que existem na corrente sanguínea. Existem também linhas de células que foram modificadas para serem capazes de sobreviver em culturas em suspensão para que possam crescer até uma densidade mais alta do que as condições aderentes permitiriam. As células aderentes requerem uma superfície, como plástico de cultura de tecido ou microtransportador , que pode ser revestida com componentes de matriz extracelular (como colágeno e laminina) para aumentar as propriedades de adesão e fornecer outros sinais necessários para o crescimento e a diferenciação. A maioria das células derivadas de tecidos sólidos são aderentes. Outro tipo de cultura aderente é a cultura organotípica, que envolve o crescimento de células em um ambiente tridimensional (3-D) em oposição a pratos de cultura bidimensionais. Este sistema de cultura 3D é bioquímica e fisiologicamente mais semelhante ao tecido in vivo , mas é tecnicamente desafiador de manter devido a muitos fatores (por exemplo, difusão).

Meio basal de cultura celular

Existem diferentes tipos de meios de cultura de células que são usados ​​rotineiramente nas ciências da vida, incluindo o seguinte:

Componentes dos meios de cultura de células

Componente Função
Fonte de carbono ( glicose / glutamina ) Fonte de energia
Aminoácido Blocos de construção de proteína
Vitaminas Promova a sobrevivência e o crescimento celular
Solução salina balanceada Uma mistura isotônica de íons para manter a pressão osmótica ideal dentro das células e fornecer íons metálicos essenciais para atuar como cofatores para reações enzimáticas, adesão celular, etc.
Tintura vermelha de fenol Indicador de pH . A cor do vermelho de fenol muda de laranja / vermelho em pH 7–7,4 para amarelo em pH ácido (mais baixo) e roxo em pH básico (mais alto).
Tampão Bicarbonato / HEPES É usado para manter um pH equilibrado na mídia

Condições típicas de crescimento

Parâmetro
Temperatura 37 ° C
CO2 5%
Humidade relativa 95%

Contaminação cruzada de linha celular

A contaminação cruzada de linha celular pode ser um problema para os cientistas que trabalham com células em cultura. Estudos sugerem que em qualquer lugar de 15 a 20% do tempo, as células usadas em experimentos foram identificadas incorretamente ou contaminadas com outra linha celular. Problemas com contaminação cruzada de linha celular foram detectados até mesmo em linhas do painel NCI-60 , que são usadas rotineiramente para estudos de triagem de drogas. Os principais repositórios de linhas de células, incluindo a Coleção Americana de Culturas de Tipo (ATCC), a Coleção Europeia de Culturas de Células (ECACC) e a Coleção Alemã de Microorganismos e Culturas de Células (DSMZ), receberam envios de linhas de células de pesquisadores que foram identificados incorretamente por eles. Tal contaminação representa um problema para a qualidade da pesquisa produzida usando linhas de cultura de células, e os principais repositórios estão agora autenticando todos os envios de linha de células. ATCC usa impressão digital de DNA de repetição curta em tandem (STR) para autenticar suas linhas de células.

Para resolver este problema de contaminação cruzada de linha de células, os pesquisadores são encorajados a autenticar suas linhas de células em uma passagem inicial para estabelecer a identidade da linha de células. A autenticação deve ser repetida antes do congelamento dos estoques de linha de células, a cada dois meses durante a cultura ativa e antes de qualquer publicação de dados de pesquisa gerados com as linhas de células. Muitos métodos são usados ​​para identificar linhas celulares, incluindo análise de isoenzima , tipagem de antígeno linfocitário humano (HLA), análise cromossômica, cariótipo, morfologia e análise de STR .

Um contaminante cruzado de linha celular significativo é a linha de células HeLa imortal .

Outros problemas técnicos

Como as células geralmente continuam a se dividir em cultura, elas geralmente crescem para preencher a área ou volume disponível. Isso pode gerar vários problemas:

  • Depleção de nutrientes na mídia de crescimento
  • Mudanças no pH do meio de crescimento
  • Acúmulo de células apoptóticas / necróticas (mortas)
  • O contato célula a célula pode estimular a interrupção do ciclo celular, fazendo com que as células parem de se dividir, o que é conhecido como inibição de contato .
  • O contato célula a célula pode estimular a diferenciação celular .
  • Alterações genéticas e epigenéticas , com uma seleção natural das células alteradas, podendo levar ao supercrescimento de células anormais adaptadas à cultura com diminuição da diferenciação e aumento da capacidade proliferativa.

A escolha do meio de cultura pode afetar a relevância fisiológica dos resultados dos experimentos de cultura de células devido às diferenças na composição e concentração de nutrientes. Um viés sistemático em conjuntos de dados gerados foi recentemente mostrado para CRISPR e telas de silenciamento de gene RNAi , e para perfis metabólicos de linhas de células cancerosas . Usar um meio de crescimento que melhor represente os níveis fisiológicos de nutrientes pode melhorar a relevância fisiológica de estudos in vitro e, recentemente, foram desenvolvidos tipos de mídia, como Plasmax e Human Plasma Like Medium (HPLM). 

Manipulação de células em cultura

Entre as manipulações comuns realizadas em células de cultura estão mudanças de mídia, células de passagem e células de transfecção. Geralmente, são realizados com métodos de cultura de tecidos baseados em técnicas assépticas . A técnica asséptica visa evitar a contaminação com bactérias, leveduras ou outras linhas celulares. As manipulações são normalmente realizadas em um gabinete de biossegurança ou gabinete de fluxo laminar para excluir microrganismos contaminantes. Antibióticos (por exemplo, penicilina e estreptomicina ) e antifúngicos (por exemplo, anfotericina B e solução de antibiótico-antimicótico ) também podem ser adicionados ao meio de crescimento.

À medida que as células passam por processos metabólicos, o ácido é produzido e o pH diminui. Freqüentemente, um indicador de pH é adicionado ao meio para medir o esgotamento de nutrientes.

Mudanças de mídia

No caso de culturas aderentes, o meio pode ser removido diretamente por aspiração e, em seguida, substituído. Mudanças de mídia em culturas não aderentes envolvem centrifugar a cultura e ressuspender as células em meio fresco.

Células de passagem

A passagem (também conhecida como subcultura ou divisão de células) envolve a transferência de um pequeno número de células para um novo vaso. As células podem ser cultivadas por mais tempo se forem divididas regularmente, pois isso evita a senescência associada à alta densidade celular prolongada. As culturas em suspensão são facilmente passadas com uma pequena quantidade de cultura contendo algumas células diluídas em um volume maior de meio fresco. Para culturas aderentes, as células primeiro precisam ser destacadas; isso é comumente feito com uma mistura de tripsina - EDTA ; no entanto, outras misturas de enzimas estão agora disponíveis para esse propósito. Um pequeno número de células destacadas pode então ser usado para semear uma nova cultura. Algumas culturas de células, como as células RAW, são raspadas mecanicamente da superfície de seus vasos com raspadores de borracha.

Transfecção e transdução

Outro método comum de manipulação de células envolve a introdução de DNA estranho por transfecção . Isso geralmente é realizado para fazer com que as células expressem um gene de interesse. Mais recentemente, a transfecção de construções de RNAi foi realizada como um mecanismo conveniente para suprimir a expressão de um determinado gene / proteína. O DNA também pode ser inserido em células usando vírus, em métodos conhecidos como transdução , infecção ou transformação . Os vírus, como agentes parasitas, são adequados para a introdução de DNA nas células, pois isso faz parte de seu curso normal de reprodução.

Linhas celulares humanas estabelecidas

As células HeLa cultivadas foram coradas com Hoechst tornando seus núcleos azuis, e são uma das primeiras linhas de células humanas descendentes de Henrietta Lacks , que morreu de câncer cervical, do qual essas células se originaram.

As linhas celulares originadas em humanos têm sido um tanto controversas na bioética , pois podem sobreviver ao seu organismo original e, mais tarde, ser usadas na descoberta de tratamentos médicos lucrativos. Na decisão pioneira nesta área, a Suprema Corte da Califórnia sustentou em Moore v. Regents da Universidade da Califórnia que os pacientes humanos não têm direitos de propriedade sobre linhagens celulares derivadas de órgãos removidos com seu consentimento.

É possível fundir células normais com uma linha celular imortalizada . Este método é usado para produzir anticorpos monoclonais . Em resumo, os linfócitos isolados do baço (ou possivelmente sangue) de um animal imunizado são combinados com uma linha de células de mieloma imortal (linhagem de células B) para produzir um hibridoma que tem a especificidade de anticorpo do linfócito primário e a imortalidade do mieloma. Meio de crescimento seletivo (HA ou HAT) é usado para selecionar contra células de mieloma não fundidas; linfócitos primários morrem rapidamente em cultura e apenas as células fundidas sobrevivem. Estes são rastreados para a produção do anticorpo necessário, geralmente em pools para começar e, em seguida, após a clonagem única.

Cepas celulares

Uma cepa de células é derivada de uma cultura primária ou de uma linha de células pela seleção ou clonagem de células com propriedades ou características específicas que devem ser definidas. As cepas de células são células que foram adaptadas para cultura, mas, ao contrário das linhas de células, têm um potencial de divisão finito. As células não imortalizadas param de se dividir após 40 a 60 duplicações populacionais e, após isso, perdem a capacidade de proliferação (evento determinado geneticamente conhecido como senescência).

Aplicações de cultura de células

A cultura em massa de linhagens de células animais é fundamental para a fabricação de vacinas virais e outros produtos de biotecnologia. A cultura de células-tronco humanas é usada para expandir o número de células e diferenciá-las em vários tipos de células somáticas para transplante. A cultura de células-tronco também é usada para colher as moléculas e exossomos que as células-tronco liberam para fins de desenvolvimento terapêutico.

Os produtos biológicos produzidos pela tecnologia de DNA recombinante (rDNA) em culturas de células animais incluem enzimas , hormônios sintéticos , imunobiológicos ( anticorpos monoclonais , interleucinas , linfocinas ) e agentes anticâncer . Embora muitas proteínas mais simples possam ser produzidas usando rDNA em culturas bacterianas, proteínas mais complexas que são glicosiladas (modificadas com carboidratos) atualmente devem ser feitas em células animais. Um exemplo importante de tal proteína complexa é o hormônio eritropoietina . O custo do cultivo de culturas de células de mamíferos é alto, então a pesquisa está em andamento para produzir essas proteínas complexas em células de insetos ou em plantas superiores, uso de uma única célula embrionária e embriões somáticos como uma fonte para transferência direta de genes via bombardeio de partículas, expressão de trânsito de genes e a observação por microscopia confocal é uma de suas aplicações. Também se oferece para confirmar a origem unicelular dos embriões somáticos e a assimetria da primeira divisão celular, que dá início ao processo.

A cultura celular também é uma técnica fundamental para a agricultura celular , que visa fornecer novos produtos e novas maneiras de produzir produtos agrícolas existentes, como leite, carne (cultivada) , fragrâncias e chifre de rinoceronte a partir de células e microorganismos. É, portanto, considerado um meio de conseguir uma agricultura sem animais . É também uma ferramenta central para o ensino de biologia celular.

Cultura de células em duas dimensões

A pesquisa em engenharia de tecidos , células-tronco e biologia molecular envolve principalmente culturas de células em pratos planos de plástico. Essa técnica é conhecida como cultura de células bidimensionais (2D) e foi desenvolvida pela primeira vez por Wilhelm Roux que, em 1885, removeu uma porção da placa medular de um frango embrionário e a manteve em solução salina morna por vários dias em um vidro plano placa. Do avanço da tecnologia de polímeros surgiu a placa de plástico padrão atual para cultura de células 2D, comumente conhecida como placa de Petri . Julius Richard Petri , um bacteriologista alemão , geralmente é responsável por essa invenção enquanto trabalhava como assistente de Robert Koch . Vários pesquisadores hoje também utilizam frascos de laboratório de cultura , cônicas e até bolsas descartáveis ​​como as usadas em biorreatores de uso único .

Além das placas de Petri, os cientistas há muito tempo cultivam células em matrizes derivadas biologicamente, como colágeno ou fibrina, e, mais recentemente, em hidrogéis sintéticos, como poliacrilamida ou PEG. Eles fazem isso a fim de eliciar fenótipos que não são expressos em substratos convencionalmente rígidos. Há um interesse crescente em controlar a rigidez da matriz , um conceito que levou a descobertas em campos como:

  • Auto-renovação de células-tronco
  • Especificação de linhagem
  • Fenótipo de células cancerosas
  • Fibrose
  • Função dos hepatócitos
  • Mechanosensing

Cultura de células em três dimensões

A cultura de células em três dimensões foi anunciada como a "Nova Dimensão da Biologia". No momento, a prática da cultura de células permanece baseada em combinações variáveis ​​de estruturas de células únicas ou múltiplas em 2D. Atualmente, há um aumento no uso de culturas de células 3D em áreas de pesquisa, incluindo descoberta de drogas , biologia do câncer, medicina regenerativa , avaliação de nanomateriais e pesquisa básica em ciências da vida . As culturas de células 3D podem ser cultivadas usando um andaime ou matriz, ou de uma maneira livre de andaime. As culturas baseadas em andaimes utilizam uma matriz 3D acelular ou uma matriz líquida. Os métodos sem andaimes são normalmente gerados em suspensões. Há uma variedade de plataformas usadas para facilitar o crescimento de estruturas celulares tridimensionais, incluindo sistemas de andaimes, como matrizes de hidrogel e andaimes sólidos, e sistemas sem andaimes, como placas de baixa adesão, levitação magnética facilitada por nanopartículas e placas suspensas penduradas. A cultura de células em 3D leva a uma ampla variação nas assinaturas de expressão gênica e imita parcialmente os tecidos nos estados fisiológicos.

Cultura de células 3D em andaimes

Eric Simon, em um relatório de concessão do NIH SBIR de 1988, mostrou que a eletrofiação pode ser usada para produzir poliestireno e policarbonato em escala nano e submicrônica, estruturas fibrosas de policarbonato especificamente destinadas ao uso como substratos celulares in vitro . Este uso inicial de redes fibrosas eletrofiadas para cultura de células e engenharia de tecidos mostrou que vários tipos de células, incluindo Fibroblastos de prepúcio humano (HFF), carcinoma humano transformado (HEp-2) e epitélio pulmonar de vison (MLE) aderem e se proliferam em fibras de policarbonato . Foi notado que, ao contrário da morfologia achatada tipicamente vista em cultura 2D, as células crescidas nas fibras eletrofiadas exibiram uma morfologia tridimensional arredondada mais histotípica geralmente observada in vivo .

Cultura de células 3D em hidrogéis

Como a matriz extracelular natural (ECM) é importante na sobrevivência, proliferação, diferenciação e migração de células, diferentes matrizes de cultura de hidrogel que mimetizam a estrutura natural de ECM são vistas como abordagens potenciais para o cultivo de células in vivo. Os hidrogéis são compostos por poros interligados com alta retenção de água, o que possibilita o transporte eficiente de substâncias como nutrientes e gases. Vários tipos diferentes de hidrogéis de materiais naturais e sintéticos estão disponíveis para cultura de células 3D, incluindo hidrogéis de extrato de ECM animal, hidrogéis de proteína, hidrogéis de peptídeo, hidrogéis de polímero e hidrogel de nanocelulose à base de madeira .

Cultivo de células 3D por levitação magnética

O método de cultivo de células 3D por levitação magnética (MLM) é a aplicação de crescimento de tecido 3D induzindo células tratadas com conjuntos de nanopartículas magnéticas em campos magnéticos que variam espacialmente usando drivers magnéticos de neodímio e promovendo interações de célula para célula ao levitar as células para o ar / interface de líquido de uma placa de Petri padrão. Os conjuntos de nanopartículas magnéticas consistem em nanopartículas de óxido de ferro magnético, nanopartículas de ouro e o polímero de polilisina. A cultura de células 3D é escalonável, com a capacidade de cultura de 500 células a milhões de células ou de placa única a sistemas de baixo volume de alto rendimento.

Cultura e engenharia de tecidos

A cultura de células é um componente fundamental da cultura de tecidos e da engenharia de tecidos , pois estabelece os fundamentos do crescimento e manutenção das células in vitro . A principal aplicação da cultura de células humanas é na indústria de células-tronco , onde as células-tronco mesenquimais podem ser cultivadas e criopreservadas para uso futuro. A engenharia de tecidos oferece potencialmente melhorias dramáticas em cuidados médicos de baixo custo para centenas de milhares de pacientes anualmente.

Vacinas

Vacinas contra poliomielite , sarampo , caxumba , rubéola e varicela são atualmente feitas em culturas de células. Devido à ameaça da pandemia de H5N1 , a pesquisa sobre o uso de cultura de células para vacinas contra a gripe está sendo financiada pelo governo dos Estados Unidos . Novas ideias na área incluem vacinas baseadas em DNA recombinante , como uma feita usando adenovírus humano (um vírus do resfriado comum) como vetor, e novos adjuvantes.

Cultura de células em dispositivo microfluídico

Cultura de células de não mamíferos

Além da cultura de linhas celulares imortalizadas bem estabelecidas, as células de explantes primários de uma infinidade de organismos podem ser cultivadas por um período limitado de tempo antes que ocorra a senescência (ver limite de Hayflick). Células primárias cultivadas têm sido amplamente utilizadas em pesquisas, como é o caso dos ceratócitos de peixes em estudos de migração celular.

Métodos de cultura de células vegetais

As culturas de células vegetais são tipicamente cultivadas como culturas de células em suspensão em um meio líquido ou como culturas de calos em um meio sólido. A cultura de células vegetais indiferenciadas e calos requer o equilíbrio adequado dos hormônios de crescimento de plantas auxina e citocinina .

Cultura de células de insetos

As células derivadas de Drosophila melanogaster (mais proeminentemente, células Schneider 2 ) podem ser usadas para experimentos que podem ser difíceis de fazer em moscas ou larvas vivas, como estudos bioquímicos ou estudos usando siRNA . As linhas celulares derivadas do verme do exército Spodoptera frugiperda , incluindo Sf9 e Sf21 , e do looper de repolho Trichoplusia ni , células High Five , são comumente usadas para expressão de proteínas recombinantes usando baculovírus .

Métodos de cultura de bactérias e leveduras

Para bactérias e leveduras, pequenas quantidades de células são geralmente cultivadas em um suporte sólido que contém nutrientes embutidos nele, geralmente um gel como o ágar, enquanto culturas em grande escala são cultivadas com as células suspensas em um caldo nutritivo.

Métodos de cultura viral

A cultura de vírus requer a cultura de células de origem mamífera, vegetal, fúngica ou bacteriana como hospedeiros para o crescimento e replicação do vírus. Vírus de tipo selvagem inteiro , vírus recombinantes ou produtos virais podem ser gerados em tipos de células diferentes de seus hospedeiros naturais nas condições certas. Dependendo da espécie do vírus, a infecção e a replicação viral podem resultar na lise da célula hospedeira e na formação de uma placa viral .

Linhagens celulares comuns

Linhagens de células humanas
Linhagens celulares primatas
Linhas de células de camundongo
Linhagens de células tumorais de rato
Linhagens de células vegetais
Linhagens celulares de outras espécies

Lista de linhas celulares

Linha celular Significado Organismo Tecido de origem Morfologia Links
3T3-L1 "Transferência de 3 dias, inóculo de 3 x 10 ^ 5 células" Mouse Embrião Fibroblasto ECACC Cellosaurus
4T1 Mouse Glândula mamária ATCC Cellosaurus
1321N1 Humano Cérebro Astrocitoma ECACC Cellosaurus
9L Rato Cérebro Glioblastoma ECACC Cellosaurus
A172 Humano Cérebro Glioblastoma ECACC Cellosaurus
A20 Mouse Linfoma B Linfócito B Celossauro
A253 Humano Ducto submandibular Carcinoma de cabeça e pescoço ATCC Cellosaurus
A2780 Humano Ovário Carcinoma de ovário ECACC Cellosaurus
A2780ADR Humano Ovário Derivado resistente à adriamicina de A2780 ECACC Cellosaurus
A2780cis Humano Ovário Derivado resistente à cisplatina de A2780 ECACC Cellosaurus
A431 Humano Epitélio da pele Carcinoma de células escamosas ECACC Cellosaurus
A549 Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
AB9 Peixe-zebra Fin Fibroblasto ATCC Cellosaurus
AHL-1 Pulmão-1 do Hamster Armênio Hamster Pulmão ECACC Cellosaurus
ALC Mouse Medula óssea Stroma PMID  2435412 Cellosaurus
B16 Mouse Melanoma ECACC Cellosaurus
B35 Rato Neuroblastoma ATCC Cellosaurus
BCP-1 Humano PBMC Linfoma de efusão primária de HIV + ATCC Cellosaurus
BEAS-2B Epitélio brônquico + híbrido de vírus Adenovírus 12-SV40 (Ad12SV40) Humano Pulmão Epitelial ECACC Cellosaurus
bEnd.3 Cérebro endotelial 3 Mouse Cérebro / córtex cerebral Endotélio Celossauro
BHK-21 Bebê Hamster Rim-21 Hamster Rim Fibroblasto ECACC Cellosaurus
BOSC23 Linha celular de empacotamento derivada de HEK 293 Humano Rim (embrionário) Epitélio Celossauro
BT-20 Tumor da mama-20 Humano Epitélio mamário Carcinoma de mama ATCC Cellosaurus
BxPC-3 Xenoenxerto de biópsia de linha 3 de carcinoma pancreático Humano Adenocarcinoma pancreático Epitelial ECACC Cellosaurus
C2C12 Mouse Myoblast ECACC Cellosaurus
C3H-10T1 / 2 Mouse Linhagem de células mesenquimais embrionárias ECACC Cellosaurus
C6 Rato Astrócito cerebral Glioma ECACC Cellosaurus
C6 / 36 Inseto - mosquito tigre asiático Tecido larval ECACC Cellosaurus
Caco-2 Humano Cólon Carcinoma colorretal ECACC Cellosaurus
Cal-27 Humano Língua Carcinoma de células escamosas ATCC Cellosaurus
Calu-3 Humano Pulmão Adenocarcinoma ATCC Cellosaurus
CGR8 Mouse Células-tronco embrionárias ECACC Cellosaurus
CHO Ovário de Hamster Chinês Hamster Ovário Epitélio ECACC Cellosaurus
CML T1 Linfócito T 1 de leucemia mieloide crônica Humano Fase aguda da CML Leucemia de células T DSMZ Cellosaurus
CMT12 Tumor mamário canino 12 Cão Glândula mamária Epitélio Celossauro
COR-L23 Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
COR-L23 / 5010 Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
COR-L23 / CPR Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
COR-L23 / R23- Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
COS-7 Cercopithecus aethiops , SV-40 com defeito na origem Macaco do Velho Mundo - Cercopithecus aethiops ( Chlorocebus ) Rim Fibroblasto ECACC Cellosaurus
COV-434 Humano Ovário Carcinoma de células da granulosa de ovário PMID  8436435 ECACC Cellosaurus
CT26 Mouse Cólon Carcinoma colorretal Celossauro
D17 Cão Metástase pulmonar Osteosarcoma ATCC Cellosaurus
DAOY Humano Cérebro Meduloblastoma ATCC Cellosaurus
DH82 Cão Histiocitose Monócito / macrófago ECACC Cellosaurus
DU145 Humano Carcinoma de próstata insensível a andrógenos ATCC Cellosaurus
DuCaP Câncer durado mater da próstata Humano Carcinoma de próstata metastático Epitelial PMID  11317521 Cellosaurus
E14Tg2a Mouse Células-tronco embrionárias ECACC Cellosaurus
EL4 Mouse Leucemia de células T ECACC Cellosaurus
EM-2 Humano Crise de explosão de CML Linha Ph + CML DSMZ Cellosaurus
EM-3 Humano Crise de explosão de CML Linha Ph + CML DSMZ Cellosaurus
EMT6 / AR1 Mouse Glândula mamária Tipo epitelial ECACC Cellosaurus
EMT6 / AR10.0 Mouse Glândula mamária Tipo epitelial ECACC Cellosaurus
FM3 Humano Metástase de linfonodo Melanoma ECACC Cellosaurus
GL261 Glioma 261 Mouse Cérebro Glioma Celossauro
H1299 Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ATCC Cellosaurus
HaCaT Humano Pele Queratinócito CLS Cellosaurus
HCA2 Humano Cólon Adenocarcinoma ECACC Cellosaurus
HEK 293 Rim Embrionário Humano 293 Humano Rim (embrionário) Epitélio ECACC Cellosaurus
HEK 293T Derivado HEK 293 Humano Rim (embrionário) Epitélio ECACC Cellosaurus
HeLa "Henrietta Lacks" Humano Epitélio do colo do útero Carcinoma cervical ECACC Cellosaurus
Hepa1c1c7 Clone 7 do clone 1 hepatoma linha 1 Mouse Hepatoma Epitelial ECACC Cellosaurus
Hep G2 Humano Fígado Hepatoblastoma ECACC Cellosaurus
Toca aqui Inseto (mariposa) - Trichoplusia ni Ovário Celossauro
HL-60 Leucemia Humana-60 Humano Sangue Mieloblasto ECACC Cellosaurus
HT-1080 Humano Fibrossarcoma ECACC Cellosaurus
HT-29 Humano Epitélio do cólon Adenocarcinoma ECACC Cellosaurus
J558L Mouse Mieloma Célula de linfócito B ECACC Cellosaurus
Jurkat Humano Glóbulos brancos Leucemia de células T ECACC Cellosaurus
JY Humano Linfoblastoide Célula B transformada por EBV ECACC Cellosaurus
K562 Humano Linfoblastoide Crise de explosão de CML ECACC Cellosaurus
KBM-7 Humano Linfoblastoide Crise de explosão de CML Celossauro
KCL-22 Humano Linfoblastoide CML DSMZ Cellosaurus
KG1 Humano Linfoblastoide AML ECACC Cellosaurus
Ku812 Humano Linfoblastoide Eritroleucemia ECACC Cellosaurus
KYO-1 Kyoto-1 Humano Linfoblastoide CML DSMZ Cellosaurus
L1210 Mouse Leucemia linfocítica Fluido ascítico ECACC Cellosaurus
L243 Mouse Hibridoma Segredos L243 mAb (contra HLA-DR) ATCC Cellosaurus
LNCaP Câncer de linfonodo da próstata Humano Adenocarcinoma prostático Epitelial ECACC Cellosaurus
MA-104 Microbiological Associates-104 Macaco Verde Africano Rim Epitelial Celossauro
MA2.1 Mouse Hibridoma Segredos MA2.1 mAb (contra HLA-A2 e HLA-B17) ATCC Cellosaurus
Ma-Mel 1, 2, 3 .... 48 Humano Pele Uma variedade de linhas celulares de melanoma ECACC Cellosaurus
MC-38 Mouse Colon-38 Mouse Cólon Adenocarcinoma Celossauro
MCF-7 Fundação do Câncer de Michigan-7 Humano Seio Carcinoma ductal de mama invasivo ER +, PR + ECACC Cellosaurus
MCF-10A Fundação do Câncer de Michigan-10A Humano Epitélio mamário ATCC Cellosaurus
MDA-MB-157 MD Anderson - Mama Metastática-157 Humano Metástase de derrame pleural Carcinoma de mama ECACC Cellosaurus
MDA-MB-231 MD Anderson - Mama Metastática-231 Humano Metástase de derrame pleural Carcinoma de mama ECACC Cellosaurus
MDA-MB-361 MD Anderson - Mama Metastática-361 Humano Melanoma (contaminado por M14) ECACC Cellosaurus
MDA-MB-468 MD Anderson - Mama Metastática-468 Humano Metástase de derrame pleural Carcinoma de mama ATCC Cellosaurus
MDCK II Madin Darby Canine Kidney II Cão Rim Epitélio ECACC Cellosaurus
MG63 Humano Osso Osteosarcoma ECACC Cellosaurus
MIA PaCa-2 Humano Próstata Carcinoma pancreático ATCC Cellosaurus
MOR / 0.2R Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
Mono-Mac-6 Humano Glóbulos brancos AML metaplásico mieloide DSMZ Cellosaurus
MRC-5 Cepa celular 5 do Medical Research Council Humano Pulmão (fetal) Fibroblasto ECACC Cellosaurus
MTD-1A Mouse Epitélio Celossauro
MyEnd Endotelial miocárdico Mouse Endotélio Celossauro
NCI-H69 Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
NCI-H69 / CPR Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
NCI-H69 / LX10 Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
NCI-H69 / LX20 Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
NCI-H69 / LX4 Humano Pulmão Carcinoma de pulmão ECACC Cellosaurus
Neuro-2a Mouse Nervo / neuroblastoma Células-tronco neuronais ECACC Cellosaurus
NIH-3T3 NIH , transferência de 3 dias, inóculo de 3 x 10 5 células Mouse Embrião Fibroblasto ECACC Cellosaurus
NALM-1 Humano Sangue periférico LMC em crise explosiva ATCC Cellosaurus
NK-92 Humano Leucemia / linfoma ATCC Cellosaurus
NTERA-2 Humano Metástase pulmonar Carcinoma embrionário ECACC Cellosaurus
NW-145 Humano Pele Melanoma ESTDAB Cellosaurus
OK Rim gambá Gambá da Virgínia - Didelphis virginiana Rim ECACC Cellosaurus
Linhas celulares OPCN / OPCT Humano Próstata Gama de linhas de tumor de próstata Celossauro
P3X63Ag8 Mouse Mieloma ECACC Cellosaurus
PANC-1 Humano Duto Carcinoma Epitelioide ATCC Cellosaurus
PC12 Rato Medula adrenal Feocromocitoma ECACC Cellosaurus
PC-3 Câncer de Próstata-3 Humano Metástase óssea Carcinoma de próstata ECACC Cellosaurus
Par Humano Leucemia de células T DSMZ Cellosaurus
PNT1A Humano Próstata Linha de tumor transformada por SV40 ECACC Cellosaurus
PNT2 Humano Próstata Linha de tumor transformada por SV40 ECACC Cellosaurus
Pt K2 A segunda linha celular derivada de Potorous tridactylis Potoroo de nariz comprido - Potorous tridactylus Rim Epitelial ECACC Cellosaurus
Raji Humano Linfoma B Semelhante a linfoblasto ECACC Cellosaurus
RBL-1 Leucemia Basofílica de Rato-1 Rato Leucemia Célula basófila ECACC Cellosaurus
RenCa Carcinoma Renal Mouse Rim Carcinoma renal ATCC Cellosaurus
RIN-5F Mouse Pâncreas ECACC Cellosaurus
RMA-S Mouse Tumor de células T Celossauro
S2 Schneider 2 Inseto - Drosophila melanogaster Embriões em estágio avançado (20-24 horas de idade) ATCC Cellosaurus
SaOS-2 Sarcoma OSteogênico-2 Humano Osso Osteosarcoma ECACC Cellosaurus
Sf21 Spodoptera frugiperda 21 Inseto (mariposa) - Spodoptera frugiperda Ovário ECACC Cellosaurus
Sf9 Spodoptera frugiperda 9 Inseto (mariposa) - Spodoptera frugiperda Ovário ECACC Cellosaurus
SH-SY5Y Humano Metástase da medula óssea Neuroblastoma ECACC Cellosaurus
SiHa Humano Epitélio do colo do útero Carcinoma cervical ATCC Cellosaurus
SK-BR-3 Câncer de mama Sloan-Kettering 3 Humano Seio Carcinoma de mama DSMZ Cellosaurus
SK-OV-3 Câncer de ovário Sloan-Kettering 3 Humano Ovário Carcinoma de ovário ECACC Cellosaurus
SK-N-SH Humano Cérebro Epitelial ATCC Cellosaurus
T2 Humano Leucemia de células T / hibridoma de linha de células B ATCC Cellosaurus
T-47D Humano Seio Carcinoma ductal da mama ECACC Cellosaurus
T84 Humano Metástase pulmonar Carcinoma colorretal ECACC Cellosaurus
T98G Humano Glioblastoma-astrocitoma Epitélio ECACC Cellosaurus
THP-1 Humano Monócito Leucemia monocítica aguda ECACC Cellosaurus
U2OS Humano Osteosarcoma Epitelial ECACC Cellosaurus
U373 Humano Glioblastoma-astrocitoma Epitélio ECACC Cellosaurus
U87 Humano Glioblastoma-astrocitoma Tipo epitelial ECACC Cellosaurus
U937 Humano Linfoma monocítico leucêmico ECACC Cellosaurus
VCaP Câncer vertebral da próstata Humano Metástase de vértebra Carcinoma de próstata ECACC Cellosaurus
Vero Do Esperanto: verda (verde, para macaco verde) reno (rim) Macaco verde africano - Chlorocebus sabaeus Epitélio renal ECACC Cellosaurus
VG-1 Humano Linfoma de derrame primário Celossauro
WM39 Humano Pele Melanoma ESTDAB Cellosaurus
WT-49 Humano Linfoblastoide ECACC Cellosaurus
YAC-1 Mouse Linfoma ECACC Cellosaurus
ANO Humano Linfoblastoide Célula B transformada por EBV Imunologia humana ECACC Cellosaurus

Veja também

Referências e notas

Leitura adicional

links externos